本病可根據流行病學、典型癥狀及病變，即小鴨發病死亡、發病急、死亡快、死亡時間集中以及肝臟有明顯的出血點或出血斑等即可作出初步診斷。

　　確診尚需進行實驗室檢驗，主要包括：

　　（一）病毒分離 以無菌操作法取病死鴨肝，按常規處理后接種9～11日齡雞胚或10～12日齡鴨胚（無母源抗體），觀察24h～124h胚體死亡情況，收集死亡胚的尿囊液作為待鑒定病毒分離物。

　　（二）病原鑒定

　　1.中和試驗，已知陽性血清具有中和DHV致死雞胚或鴨胚的能力。

　　2.血清保護試驗：用1～5日齡易感雛鴨，每只皮下注射1ml～2ml陽性血清，1d～3d后用0.2ml～0.5ml病毒分離物或處理好的病料肌注。接種DHV陽性血清的雛鴨保護率達80%～100%，而對照鴨死亡率50%以上。

　　以上這兩種試驗實用、特異性高，但所需時間較長，是目前用于診斷或血清流行病學調查的常規方法。

　　(三)其他血清學診斷方法

　　1.酶聯免疫吸附試驗（ELISA）和斑點酶聯免疫吸附試驗（Dot-ELISA），可用于鑒定分離物和病料中的DHV或檢測血清中的抗體，其特點是快速、敏感、特異性好，其中Dot-ELISA比ELISA更為簡便。

　　2.膠體金免疫電鏡技術檢測DHV，具有簡便、快速、靈敏、特異性好、直觀等特點。與Dot-ELISA與ELISA相比，膠體金免疫電鏡技術檢測DHV更為直觀。

　　3.SPA協同凝集試驗快速檢測DHV，該法需要樣品中強毒含毒量達1000LD50/0.2ml（１日齡雛鴨）時才出現陽性；弱毒疫苗樣品中需含1×104 LD50/0.2ml（9日齡雞胚）才出現陽性。具有特異、簡便、快速等優點，特別適合于臨床檢測肝臟樣品和實踐中對疫苗含毒量的檢測。